Numéro de carte de crédit américain DMF n° 41707
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Étude des impuretés
Une caractérisation complète a été réalisée contre RLD, y compris FLP, CNET, ADP, IDP, N P (mocG, mocA, moe meU, moe meC), NP (mocG, mocA, moe meU, moe meC), 2'-MOE, 2'-O-EOE, élution frontale, post-élution, etc.
Similitude
- Spectrométrie de masse (MS/MS) :
- Détermine le poids moléculaire exact du nusinersen pour vérifier sa composition chimique.
- La technique Tandem MS (MS/MS) fragmente l'oligonucléotide pour confirmer l'intégrité de sa séquence et identifier les impuretés ou les produits de dégradation.
- Spectroscopie par résonance magnétique nucléaire (RMN) :
- Valide la structure tridimensionnelle du nusinersen, garantissant un appariement de bases et une conformation du squelette corrects.
- Détecte les écarts ou modifications structurelles potentielles.
- Chromatographie liquide (LC) :
- Sépare le nusinersen des impuretés, des excipients ou des sous-produits liés au processus.
- Quantifie la pureté et surveille la stabilité dans les conditions de stockage.
- Température de fusion duplex (Tm) :
- Mesure la stabilité thermique du duplex formé entre le nusinersen et son brin d'ARN complémentaire.
- Reflète la force de liaison et l’efficacité d’hybridation, essentielles à son mécanisme d’action.
- Spectroscopie de dichroïsme circulaire (CD) :
- Analyse la structure secondaire (par exemple, l'hélice de forme A) du nusinersen.
- Assure un pliage correct et une stabilité conformationnelle.
- Calorimétrie différentielle à balayage (DSC) :
- Évalue la stabilité thermique en mesurant l’absorption de chaleur lors des transitions structurelles (par exemple, la dénaturation).
- Évalue la cohérence d’un lot à l’autre et la robustesse de la formulation.
- Chromatographie d'exclusion stérique (SEC) :
- Détermine la distribution de la taille des oligonucléotides et détecte les agrégats ou les fragments.
- Assure que le nusinersen reste monomère et dans les limites de taille spécifiées.
- Ultracentrifugation analytique de la vitesse de sédimentation (SV-AUC) :
- Fournit une analyse haute résolution du poids moléculaire, de la forme et de l'état d'agrégation.
- Valide l’homogénéité et confirme l’absence d’agrégats d’ordre supérieur.
Documentation et réglementation
Conformité à la FDA américaine.